Ocena ekspresji oraz funkcji wybranych receptorów odporności wrodzonej na komórkach śródbłonka jako podstawa do opracowania nowych strategii terapeutycznych w profilaktyce oraz leczeniu miażdżycy.
Moje zainteresowania naukowe obejmują patogenezy miażdżycy, koncentruję się głównie na określeniu jej molekularnych mechanizmów. Głównym celem realizowanych przeze mnie badań jest opracowanie skutecznych metod profilaktycznych i terapeutycznych. Moje dotychczasowe badania koncentrowały się na ocenie wpływu czynników proaterogennych na dysfunkcji; śródbłonka naczyniowego. Obejmują one oceny roli stresu oksydacyjnego w aktywacji procesu zapalnego w komórkach śródbłonka poprzez indukcję ekspresji cząsteczek adhezyjnych (ICAM, VCAM), czynników chemotaktycznych (MCP-1) a także aktywację ścieżek sygnałowych kinaz, aktywowanych mitogenami (ERK, JNK, p38) oraz czynnika jądrowego - KB
Celem prowadzonych badań jest ocena ekspresji oraz funkcji receptorów odporności wrodzonej w rozwoju stanu zapalnego w komórkach śródbłonka. Badania będą prowadzone z wykorzystaniem:
- hodowli komórkowych - komórki śródbłonka z żył pępowinowych (HUVEC),
- preparatów blaszek miażdżycowych (N 40) materiał obecnie zebrany od pacjentów z tętnicy szyjnej podczas planowej endarektomii otwartej — badania będą wykonywane we współpracy z Kliniką Otorynolaryngologii Wydziału Lekarsko-Dentystycznego Warszawskiego Uniwersytetu Medycznego (zgoda komisji bioetycznej KB/92/2008) - dysponujemy charakterystyką kliniczną tych pacjentów.
Realizacja badan obejmuje:
- określenie poziomu ekspresji receptorów: TLR 2, TLR 4, TLR 7, TLR 9, RAGE oraz białka H1MGB1 i czynnika jądrowego - KB w komórkach śródbłonka z żył pępowinowych (HUVEC) przed i po stymulacji ligandami badanych receptorów za pomocą cytometrii przepływowej
- ocenę wpływu inhibitorów poszczególnych receptorów na stymulowaną ligandami ekspresję czynnika jądrowego KB, białka HMGB1 (cytometria przepływowa) oraz ekspresję IL-6 w komórkach śródbŁonka (test Elisa)
- ocena ekspresji receptorów TLR 2, TLR 4, TLR 7, TLR 9, RAGE oraz białka H1MGB1 i czynnika jądrowego - KB w blaszce miażdżycowej za pomocą immunohistochemii
Dostępne dane naukowe wskazują na istotną rolę receptorów odporności wrodzonej, tj.: receptory toll- podobne (TLR) oraz. receptory dla zaawansowanych końcowych produktów glikacji (RAGE) w patogenezie miażdżycy. Niewłaściwa aktywacja tych receptorów powoduje zakłócenia homeostazy organizmu. Brak sygnalizacji z udziałem tych receptorów naraża organizmu na atak patogenny, natomiast nadmierna aktywacja powoduje niekontrolowane uwalnianie wielu cytokin prozapalnych oraz chemokin prowadząc do rozwinięcia stanu zapalnego, co z kolei nasila rozwój procesu miażdżycowego. Głównym wyzwaniem dla przyszłej, skutecznej terapii celowanej u pacjentów z miażdżycą jest zahamowanie procesu zapalnego związanego z tą chorobą bez wpływu na odporność wrodzoną organizmu. Toteż istotne znaczenie ma poznanie dróg transdukcji sygnału i funkcji poszczególnych receptorów odporności wrodzonej oraz. roli ich selektywnych inhibitorów. Pozwoli to na kontrolę odpowiedzi immunologicznej i blokowanie procesów negatywnych dla gospodarza. Obecnie dysponujemy jedynie wybiórczymi danymi w tym zakresie i konieczne jest przeprowadzenie badań dokumentujących wpływ hamowania aktywności tych receptorów na rozwój miażdżycy.
Planowane badania dostarczą istotnych i brakujących informacji na temat roli receptorów odporności wrodzonej w indukcji stanu zapalnego w komórkach śródbłonka. Zostanie udokumentowany wpływ selektywnych inhibitorów tych receptorów czego elektem będzie wskazanie możliwości zastosowania tych inhibitorów w leczeniu stanów zapalnych, co umożliwi kontrolę odpowiedzi immunologicznej i blokowanie procesów zapalnych bez wpływu na naturalną barierę ochronną organizmu. Ocena stopnia nasilenia stanu zapalnego poprzez określenie ekspresji wybranych receptorów w blaszce miażdżycowej pobranej od pacjentów z tętnicy szyjnej dostarczy nowych danych na temat roli tych receptorów w regulowaniu procesów zapalnych Przeprowadzone badania będą podstawą do opracowania nowych, skutecznych strategii terapeutycznych w profilaktyce oraz leczeniu miażdżycy.