Analiza roli białek ERM i merlin w procesie formowania struktur entotycznych oraz identyfikacja nowych molekularnych regulatorów entoz w komórkach nowotworowych

Symbol
NCN102
Rok początku realizacji
2024
Supervisor
Katarzyna Stefańska
Project Title
Analiza roli białek ERM i merlin w procesie formowania struktur entotycznych oraz identyfikacja nowych molekularnych regulatorów entoz w komórkach nowotworowych
Code
1M15
Financing Institution
Lead
Agata Gaweł
Total awarded funds MUW ONLY
209 320,00
Total awarded funds FOR ALL
209 320,00
Project Objective

Ponieważ entoza jest procesem wciąż nie do końca zdefiniowanym, a wiedza dotycząca mechanizmów i czynników molekularnych zaangażowane w promowanie internalizacji komórek jest słaba, naszym celem jest identyfikacja i walidacja nowych genów, białek i biologicznych szlaki związane z rozwojem struktur entotycznych.  Pierwszym konkretnym celem jest wyjaśnienie roli ekspresji i aktywacji ERM i merlina w procesie tworzenia struktur entotycznych. Naszym drugim konkretnym celem jest identyfikacja nowych genów i szlaków sygnałowych wpływających na tworzenie figur entotycznych in vitro, przy użyciu analizy seq RNA opartej na sekwencjonowaniu nowej generacji (NGS). Wstępne dane. W naszych badaniach pilotażowych ocenialiśmy częstość występowania entozy w tkance pierwotnego i przerzutowego raka piersi. W badaniu wykazano, że całkowita liczba entoz w guzie przerzutowym jest istotnie większa w porównaniu z guzem przerzutowym guz pierwotny. W badaniu in vitro na komórkachpochodzących z raka piersi i trzustki podkreśliliśmy rolę PDPN (podoplanina) w rozwoju komórek entotycznych. Odkryliśmy, że PDPN działa jako inhibitor entozy. Co ważne, my zaobserwowaliśmy, że wyczerpanie PDPN aktywuje wybrane białka z rodziny FERM (ERM - ezrin/radixin/moesin i merlin). Zakładamy zatem, że profil ekspresji genów w komórkach entotycznych różni się od ekspresji genów komórek nieentotycznych komórki i niektóre dotknięte geny w komórkach entotycznych mogą mieć kluczowe znaczenie dla tworzenia struktur CIC. Zwłaszcza, że ​​jesteśmy zainteresowany badaniem związku między poziomem wewnątrzkomórkowym a stanem aktywacji białek będących przedmiotem zainteresowania, oraz częstotliwość powstawania struktur entotycznych. Ponadto oczekuje się selekcji komórek entotycznych za pomocą cytometrii przepływowej i analizy ich profilu ekspresji (sekwencja RNA) aby odkryć nowe regulatory entozy. Według naszej wiedzy, takiego badania nie przeprowadzono wcześniej. Oczekujemy, że wyniki odkryją nowe molekularne sterowniki entozy.