Analiza roli białek ERM i merlin w procesie formowania struktur entotycznych oraz identyfikacja nowych molekularnych regulatorów entoz w komórkach nowotworowych

Ponieważ entoza jest procesem wciąż nie do końca zdefiniowanym, a wiedza dotycząca mechanizmów i czynników molekularnych zaangażowane w promowanie internalizacji komórek jest słaba, naszym celem jest identyfikacja i walidacja nowych genów, białek i biologicznych szlaki związane z rozwojem struktur entotycznych.  Pierwszym konkretnym celem jest wyjaśnienie roli ekspresji i aktywacji ERM i merlina w procesie tworzenia struktur entotycznych. Naszym drugim konkretnym celem jest identyfikacja nowych genów i szlaków sygnałowych wpływających na tworzenie figur entotycznych in vitro, przy użyciu analizy seq RNA opartej na sekwencjonowaniu nowej generacji (NGS). Wstępne dane. W naszych badaniach pilotażowych ocenialiśmy częstość występowania entozy w tkance pierwotnego i przerzutowego raka piersi. W badaniu wykazano, że całkowita liczba entoz w guzie przerzutowym jest istotnie większa w porównaniu z guzem przerzutowym guz pierwotny. W badaniu in vitro na komórkachpochodzących z raka piersi i trzustki podkreśliliśmy rolę PDPN (podoplanina) w rozwoju komórek entotycznych. Odkryliśmy, że PDPN działa jako inhibitor entozy. Co ważne, my zaobserwowaliśmy, że wyczerpanie PDPN aktywuje wybrane białka z rodziny FERM (ERM - ezrin/radixin/moesin i merlin). Zakładamy zatem, że profil ekspresji genów w komórkach entotycznych różni się od ekspresji genów komórek nieentotycznych komórki i niektóre dotknięte geny w komórkach entotycznych mogą mieć kluczowe znaczenie dla tworzenia struktur CIC. Zwłaszcza, że ​​jesteśmy zainteresowany badaniem związku między poziomem wewnątrzkomórkowym a stanem aktywacji białek będących przedmiotem zainteresowania, oraz częstotliwość powstawania struktur entotycznych. Ponadto oczekuje się selekcji komórek entotycznych za pomocą cytometrii przepływowej i analizy ich profilu ekspresji (sekwencja RNA) aby odkryć nowe regulatory entozy. Według naszej wiedzy, takiego badania nie przeprowadzono wcześniej. Oczekujemy, że wyniki odkryją nowe molekularne sterowniki entozy.